果蝇的单因子杂交材料、原理和步骤

通过实验深刻理解孟德尔分离定律；学习遗传学实验结果记录及统计处理方法。

二、实验材料：

野生型：长翅（+ / +） 突变型：残翅（vg / vg）

三、实验原理：

果蝇长翅座位是Ⅱ67.0，长翅对残翅完全显性。残翅果蝇的双翅几乎没有，只有少量残痕，不能飞翔。

正交： P： 长翅（♀）×残翅（♂） 反交：残翅（♀）×长翅（♂）

（+/+） （vg / vg） （vg / vg） （+/+）

↓ ↓

F1： 长翅 长翅

（+/ vg） （+/ vg）

↓ ↓

F2： 长翅 残翅 长翅 残翅

（+/+ +/vg） （vg / vg） （+/+ +/vg） （vg / vg）

1 ： 2 ： 1 1 ： 2 ： 1

一对杂合状态的等位基因，在遗传上保持相对的独立性，在配子形成时按原样分离到不同的配子中去，配子分离比为1：1，其自交后代中基因型分离比为1：2：1，表型分离比为3：1。

四、实验内容：

1、 选处女蝇：将旧瓶中的果蝇麻醉处死，在8-12h内收集处女蝇，每组做正交、反交各1瓶，每瓶中5对果蝇，确保杂交瓶中各只果蝇麻醉苏醒，没有死蝇。贴好标签，于25℃培养；

2、 7d后，处死杂交亲本；

3、 再过4-5天，F1成蝇出现，在处死亲本7天后，集中观察记录F1表型；

4、 选取正、反交各5对F1果蝇，分别转入一新培养瓶，于25℃培养，其余F1代果蝇处死；

5、 7d后，处死F1亲本；

6、 再过5d，F2成蝇出现，开始观察记录，连续统计7d；

五、备注：

1、由于雌蝇生殖器官中有贮精囊，一次交配可保留大量精子，供多次排卵受精用，因此做杂交实验前必须收集未交配过的处女蝇。由于孵化出的幼蝇在12h内（更可靠是8h内）不交尾，因此必须在这段时间内把雌、雄果蝇分开培养，所得的雌蝇即为处女蝇。

2、x2测验用来表示实得数与理论数的差异，又被称为卡平方。所得结果当P<0.05时，认为实得数据与理论比数间有显著差异，应把假设的分离比否定；当P<0.01时，认为实得数据与理论比数间有极显著差异，更有把握把假设的分离比否定掉。

3、n表示自由度，表示在各项预期值决定后，实得数中有几项能自由变动。在分离比数的适合度测验中，自由度一般等于子代分类数减一。如果蝇两个实得数据残翅和长翅中，一旦长翅数目被固定下来，则残翅数目就不能自由变动，因为子代总数目是一定的。所以它的自由度是1。

果蝇的单因子杂交实验

F1：

F2：

对F2代的统计结果做x²测验：

自由度＝n－1＝

x²＝∑(O-E)²/E＝

查x²表，进行差异显著水平检验