沉淀反应实验：火箭电泳(rocket electrophoresis)实验

火箭电泳实验

火箭电泳实际是一种定量免疫电泳。其原理为：在电场作用下，抗原在含定量抗体的琼脂介质中泳动，二者比例在合适时在较短时间内形成状似火箭或锥形的沉淀线，而此沉淀线的高度常与抗原量成正比关系，因此本法可以测定样品中抗原的含量。

1、材料

（1）诊断血清（抗体）：抗人IgG或IgA免疫血清

（2）待检血清（抗原）：人血清

（3）参考血清

（4）pH8.6，离子强度0.05M巴比妥缓冲液配制（见对流免疫电泳实验）

（5）其它：琼脂粉，微量进样器，打孔器，玻璃板，电泳仪

2、方法

（1）抗体琼脂板的制备

同单向扩散法，但注意稀释液应用pH8.6离子强度0.05M的巴比妥缓冲液。

（2）打孔见下图

（3）将用缓冲液稀释的适宜浓度的参考血清及适当稀释的抗原（人血清）分别加入各孔中，每孔10或20微升，要求加量准确而不外溢。

（4）把加完样的免疫琼脂板放入电泳槽中进行电泳，电压4—6伏/厘米，电泳时间1—5小时，直到大部分抗原孔前端出现顶端尖窄而完全闭合的火箭状沉淀线，关闭电源。

（5）取下琼脂板，以抗原孔中心为起点，量出各火箭状沉淀线的高度。同单向琼脂扩散法绘制标准曲线，查出待检血清中Ig含量。