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比色法检测代谢物的实验中,如何选择合适的检测波长?

作者:中华医学网发布时间:2026-04-10 10:36浏览:

比色法选择检测波长的核心方法(考试 + 实验通用)

 
  1. 找最大吸收峰(λmax)
     
    用显色后的标准液在不同波长下扫描吸光度,吸光度最大的波长,定为检测波长
     
  2. 遵循 “最大吸收、最小干扰” 原则
     
    • 吸光度最大的波长:灵敏度最高
    • 避开试剂、杂质、溶血、脂血等有吸收的波长,减少干扰
     
  3. 常用经验波长(直接背)
     
    • 蛋白质(Bradford):595 nm
    • 葡萄糖(酶法):505 nm 或 546 nm
    • 胆固醇 / 甘油三酯:500~550 nm
    • 核酸:DNA 260 nm,蛋白质干扰 280 nm
     
  4. 简单判断方法
     
    溶液显什么颜色,就选它的互补色光
     
    • 红色溶液 → 选 蓝绿色光(500~550 nm)
    • 蓝色溶液 → 选 黄色光(580~620 nm)
     
 
一句话总结:
 
扫描找最大吸收峰,选吸光度最高、干扰最小的波长。