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判断 RNA 中是否有基因组 DNA 污染的其他方法

作者:中华医学网发布时间:2026-04-10 10:20浏览:

  • 琼脂糖凝胶电泳法
     
    RNA 电泳后,在 28S rRNA 条带上方出现高分子量条带或整体弥散拖尾,提示存在基因组 DNA 污染。
     
  • RT‑PCR 阴性对照法(–RT 对照)
     
    设置不加逆转录酶的对照组,若该组仍扩增出目的条带,说明 RNA 模板中存在基因组 DNA 污染。
     
  • 跨内含子引物 PCR 法
     
    使用跨内含子设计的引物进行 PCR:
     
    • 若扩出大片段基因组产物,证明有 gDNA 污染;
    • 仅出现 cDNA 小片段则无污染。
     
  • 荧光定量 PCR 法
     
    直接通过扩增曲线与 Ct 值判断:无逆转录的对照组出现明显扩增,即为基因组 DNA 污染。