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除了紫外分光光度法,还有哪些方法可以检测模板DNA的纯度?

作者:中华医学网发布时间:2026-04-10 10:11浏览:

1. 琼脂糖凝胶电泳法

 
  • 直接观察 DNA 条带是否清晰、无拖尾、无弥散
  • 前端无模糊亮带(无 RNA 污染)
  • 加样孔不发亮(无蛋白质 / 多糖污染)
  • 可同时判断完整性 + 纯度
 

2. 荧光定量法(Qubit 荧光光度计)

 
  • 荧光染料特异性结合 DNA,不受蛋白、盐干扰
  • 给出真实有效 DNA 浓度
  • 与紫外结果对比可判断是否存在抑制物污染
 

3. PCR 扩增试验(功能纯度检测)

 
  • 用待测模板进行 PCR 扩增
  • 能特异性扩增、无非特异条带 → 纯度合格
  • 扩不出或条带差 → 存在Taq 酶抑制剂(血红素、多糖、酚等)
 

4. 毛细管电泳(Bioanalyzer / 片段分析仪)

 
  • 高精度检测 DNA 纯度、完整性、片段分布
  • 可区分 DNA、RNA、蛋白、降解片段
  • 多用于高通量测序文库质检
 

5. 蛋白质残留测定(Bradford / BCA 法)

 
  • 专门检测 DNA 中蛋白质污染程度
  • 蛋白含量越低,DNA 纯度越高
 

6. 气相 / 液相色谱(GC/HPLC)

 
  • 检测有机溶剂残留(乙醇、酚、异戊醇等)
  • 多用于高纯度 DNA 样品质控
 

 

极简背诵版(简答直接用)

 
可采用琼脂糖凝胶电泳、荧光定量法、PCR 扩增试验、毛细管电泳、蛋白质定量法等方法,分别从完整性、有效浓度、扩增功能及杂质残留等方面检测 DNA 纯度