1. 琼脂糖凝胶电泳法
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直接观察 DNA 条带是否清晰、无拖尾、无弥散
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前端无模糊亮带(无 RNA 污染)
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加样孔不发亮(无蛋白质 / 多糖污染)
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可同时判断完整性 + 纯度
2. 荧光定量法(Qubit 荧光光度计)
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荧光染料特异性结合 DNA,不受蛋白、盐干扰
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给出真实有效 DNA 浓度
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与紫外结果对比可判断是否存在抑制物污染
3. PCR 扩增试验(功能纯度检测)
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用待测模板进行 PCR 扩增
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能特异性扩增、无非特异条带 → 纯度合格
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扩不出或条带差 → 存在Taq 酶抑制剂(血红素、多糖、酚等)
4. 毛细管电泳(Bioanalyzer / 片段分析仪)
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高精度检测 DNA 纯度、完整性、片段分布
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可区分 DNA、RNA、蛋白、降解片段
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多用于高通量测序文库质检
5. 蛋白质残留测定(Bradford / BCA 法)
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专门检测 DNA 中蛋白质污染程度
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蛋白含量越低,DNA 纯度越高
6. 气相 / 液相色谱(GC/HPLC)
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检测有机溶剂残留(乙醇、酚、异戊醇等)
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多用于高纯度 DNA 样品质控
极简背诵版(简答直接用)
可采用琼脂糖凝胶电泳、荧光定量法、PCR 扩增试验、毛细管电泳、蛋白质定量法等方法,分别从完整性、有效浓度、扩增功能及杂质残留等方面检测 DNA 纯度