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抗体的制备方法

作者:中华医学网发布时间:2026-04-10 09:37浏览:

抗体的制备方法(精简考试版)

 

一、多克隆抗体制备

 
  1. 免疫动物:将抗原免疫兔、羊、鼠、马等
  2. 采血分离血清
  3. 纯化:盐析、离子交换、亲和层析
 
  • 特点:制备快、亲和力高,但特异性稍差、批间差大
 

二、单克隆抗体制备(杂交瘤技术)

 
  1. 免疫小鼠
  2. 取脾细胞(B 细胞)骨髓瘤细胞融合
  3. HAT 培养基筛选杂交瘤细胞
  4. 亚克隆化,筛选特异性高的单克隆细胞株
  5. 体外培养或小鼠腹水制备,纯化抗体
 
  • 特点:特异性高、均一性好、可稳定量产,诊断试剂主流
 

三、基因工程抗体

 
  1. 嵌合抗体:鼠可变区 + 人恒定区
  2. 人源化抗体:降低免疫原性
  3. 全人源抗体:噬菌体展示、转基因小鼠
  4. 小分子抗体:Fab、scFv、单域抗体
 
  • 特点:适合治疗药物、高通量筛选、稳定性好
 

四、噬菌体展示技术

 
  • 体外直接筛选抗体基因,无需免疫动物
  • 快速获得高特异性、人源化抗体
  • 广泛用于诊断原料与新药研发