化学发光技术检测自身免疫性疾病的原理
(简明、考试可直接背诵版)
核心原理:
利用抗原 - 抗体特异性结合 + 化学发光信号定量,
检测患者血清中的自身抗体,从而判断是否存在自身免疫性疾病。
1. 反应原理(三步法)
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固相抗原捕获自身抗体
试剂盒将纯化自身抗原(如核抗原、dsDNA、SSA、SSB、CCP 等)包被在磁珠或固相载体上。
患者血清中的自身抗体与抗原特异性结合。
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加入酶 / 发光标记二抗
加入标记了辣根过氧化物酶(HRP)或碱性磷酸酶(AP)的抗人 IgG 二抗,
与已结合的自身抗体结合,形成:
固相抗原 → 自身抗体 → 酶标二抗 复合物
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加入发光底物产生光信号
加入发光底物后,酶催化底物发生化学反应,产生可见光。
仪器检测发光强度(RLU)。
2. 定量关系
发光强度与患者血清中自身抗体的含量成正比
通过标准曲线计算出抗体具体浓度或滴度,实现精准定量。
3. 一句话极简总结
将自身抗原固定在载体上,捕获患者血清中的自身抗体,再通过酶促化学发光反应,根据发光强度定量检测自身抗体水平,用于自身免疫病诊断与监测