多糖结合疫苗的主要制备技术

1. 溴化氰（CNBr）活化法

    

   活化多糖羟基，形成活性酯或氨基反应位点，再与载体蛋白氨基偶联，是经典传统方法。
    
2. 高碘酸氧化法

    

   用高碘酸盐氧化多糖中的邻二醇结构生成醛基，再与蛋白氨基形成席夫碱，经还原得到稳定结合物，操作简便、应用广泛。
    
3. 羧基活化法（EDC/NHS）

    

   先在多糖上引入羧基或直接活化羧基，再通过 EDC/NHS 与蛋白氨基形成酰胺键，条件温和、副反应少。
    
4. 马来酰亚胺 - 巯基偶联

    

   分别在多糖和蛋白上引入马来酰亚胺与巯基，发生特异性加成反应，位点专一、偶联效率高、产物均一。
    
5. 还原胺化法

    

   多糖氧化产生醛基，在还原剂存在下直接与蛋白氨基反应形成稳定仲胺，是目前工业最常用的方法之一。
    
6. 杂双功能交联剂法

    

   使用戊二醛、ADH、SPDP 等双功能试剂作为连接臂，实现多糖与蛋白的偶联。
    
7. 位点特异性偶联技术

    

   在多糖或蛋白特定位点进行修饰，实现精准、可控偶联，提高结合物均一性与免疫原性