除了生物信息学预测,常用的B 细胞表位鉴定 / 筛选方法主要有以下几类,适合考试直接作答:
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噬菌体展示技术
构建随机肽库或抗原片段库,用特异性抗体筛选高亲和力结合肽,从而确定 B 细胞表位。
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多肽阵列 / 肽芯片技术
合成覆盖抗原全长的重叠多肽,固定在芯片上,通过抗体结合反应定位表位区域。
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X 射线晶体衍射与冷冻电镜
解析抗原 - 抗体复合物三维结构,直接观察并确定结合界面的氨基酸残基,结果最准确。
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定点突变技术
对抗原氨基酸进行逐点突变,检测抗体结合能力变化,确定关键表位残基。
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酶联免疫吸附实验(ELISA)
合成抗原片段肽,通过 ELISA 检测其与特异性抗体的结合活性,鉴定功能性表位。
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免疫印迹(Western Blot)
利用抗原片段与抗体的结合反应,初步定位线性 B 细胞表位。
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表面等离子体共振(SPR)
实时检测抗原多肽与抗体的亲和力,精确筛选高亲和力表位。