在疾病活动期，白细胞升高，血沉增速，C-反应蛋白阳性。HLA-B27阳性率50%～80%。类风湿因子和抗核抗体阴性。滑液检查，外观清或浑浊，白细胞升高，以多核为主。滑膜组织病理学检查表现为非特异性血管炎。大便细菌培养对诊断反应性关节炎有价值。然而由于抗生素的应用或感染的自然清除，所以在关节症状出现时，细菌培养常呈阴性，因此强调宜在前驱感染时进行细菌培养。另外还应做有关的细菌血清学凝集试验，如诊断耶尔森菌关节炎，有赖于其凝聚抗体滴度大于1∶160，通常急性期其效价可高达1∶20480，一般最高峰在感染后2周，一个月后开始下降。诊断沙门菌感染，其抗体滴度需≥1∶160。甲型链球菌感染可有抗“O”效价升高，通常≥500单位。
X线检查可有轻度、暂时的骨质疏松或正常。未见到如瑞特综合征的骨质侵蚀和骨膜炎改变。有3%～20%急性反应性关节炎有X线骶髂关节炎，而许多患者既往没有关节炎病史。