血淋巴细胞培养染色体检查
一、 适应症：
（一） 习惯性流产、原发不孕及分娩过染色体异常儿的夫妇。
（二） 原发闭经、月经稀发、卵巢早衰等月经病患者。
（三） 外生殖器畸形、性别不明确的男女。
（四） 原因不明的先天性智力低下患者。
（五） 各类畸形新生儿或父母染色体异常的新生儿。
二、 培养前准备
（一） 所用器皿须经肥皂水、清水、蒸馏水冲洗，过酸清洁烤干消毒备用，消毒时间超过二周要重新消毒。
（二） 术前紫外线照射无菌室每周用苍术熏烟1次。
（三） 无菌条件下抽取外周血1—2ml，肝素抗凝。
（四） 洗手，戴上口包、帽后，换鞋进入无菌室。
三、 培养
（一） 用pH为7.2~7.4的1640培养液4ml，加入肝牛血清1ml，PHA0.2ml及血液0.5ml。
（二） 37℃培养箱中培养68~72小时，加入秋水仙素终止分裂。
（三） 加入秋水仙素后继续培养3~6小时。
（四） 每天观察培养箱温度及培养物情况，看有无溶血及污染，培养箱温度控制在37±0.5℃为宜。
四、 收获
（一） 收集细胞：培养物倒入尖底离心管、以800~1000转/分速度离心5分钟去上清液。
（二） 低渗：加入预温为0.075M氯化钾8至10ml，37℃水溶中低渗30分钟。
（三） 预固定：以3：1甲醇冰醋酸0.5ml固定30分至1小时2次，必要时4℃冰箱过夜。
（四） 冰片滴片，火焰上过数次。
五、 G带的制备
（一） 将玻片放于70℃烤箱7~10小时或放于37℃温箱中72小时。
（二） 胰酶消化：用Difico胰酶液（浓度为2.5%）0.5ml溶于60ml生理盐水中，再用3%Tris液及0.4%酚红调节pH值7.2~7.4，37℃水溶箱中预温。
（三） 染缸内溶液温度达到37℃时放入玻片每次要摸索消化时间，一般为60~80秒。
（四） 用pH6.8的磷酸缓冲液配制的20：1吉姆氏染色15~20分钟。HHHhhhhhhhhhhh
六、 C带的制备
（一） 把5%氢氧化钡和2XSSC溶液各50ml分装两染缸中，置于60℃水溶箱中。
（二） 把常规制备的染色体新鲜片子放入5%氢氧化钡溶液中处理30秒。
（三） 取出清水冲洗干净后再放入2XSSC液中1~1.5小时。
（四） 取出清水冲洗干净后以20：1的吉姆氏染色5分钟。
七、 镜检
（一） 每例镜下计数30个分裂相，画图分析3个分裂相，嵌合体则计数50个分裂相，各系细胞分析3个分裂相。
（二） 画图分析有异常或可疑的，摄片3至5个分裂相，剪贴分析。
（三） 培养基pH值严格控制在7.2~7.4之间，以利细胞生长。
（四） 所用固定液必须新鲜配制。
（五） 配成水的培养基存放时间不应超过三个月。