作者：中华医学网发布时间：2020-01-18 20:45浏览：
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疾病的分子机制是指一种狭义的概念，是指大分子（蛋白质与核酸）在疾病发生、发展中的作用。这里我们只阐述遗传性疾病中的基因突变机制。同样，把由于基因突变、缺失或表达障碍引起的疾病也称为“基因病”。
一、基本概念与分类
（一）基因病的分类
1.单基因病
单基因病是指由单个基因缺陷引起的疾病。 目前已发现五六千种单基因病。其中，多数单基因病表现为显性遗传；有的为隐性遗传；还有的呈 X 性连锁遗传（如血友病）。
2.多基因病
多基因病是指由多个基因的结构或表达调控的改变引起的疾病。例如，高血压、糖尿病、自身免疫性疾病和恶性肿瘤等都属于多基因病。多基因病的相关基因在致病过程中发挥的作用可能等同，也可能有主有次。另外，也受年龄和环境因素影响，表现出基因的易感性。
3.获得性基因病
获得性基因病是指由病原微生物感染引起宿主细胞的基因改变或丧失，但不会遗传。如 HBV 、 HCV 可整合到肝细胞的 DNA 上导致肝癌发生。
（二）基因突变
基因突变（ gene mutation ）是指基因组 DNA 分子在结构上发生核酸序列或数目的改变。我们讲基因突变存在于整个生物界，同样基因突变也是一把双刃剑：首先，没有基因的突变，就没有进化；另外，基因突变可以导致基因病的发生。
基因的突变存在突变热点（ hot spots of mutation ）或突变区。因为 DNA 分子上的各个部位碱基发生突变的频率不同，某的部位突变频率高的称为突变区，突变频率低的称保守区。如只涉及单个碱基改变者称点突变（point mutation）。
1.基因突变的一般特征
（1）多向性
基因突变的多向性是指同一位点（ locus ）上的同一祖先基因可独立发生多次突变，形成等位基因（ multiple gene ）。例如，在染色体的某一个位点存在基因 A ，在一定的条件下基因 A 发生突变形成 A1，再突变形成 A2、 A3、 A4等，并表现出不同的表型，形成复等位基因。人类最典型的例子是 ABO 血型的复等位基因存在。
（2）可逆性
基因突变的方向是可逆的，一个显性基因 A 可以突变为隐性基因 a ，同样，隐性基因 a 也可以突变为显性基因 A ，恢复原来的状态。前者称为正突变；后者称为回复突变。但是正突变的几率远远大于回复突变。
（3）有害性
大部分基因突变，对人体来讲是有害的。遗传性疾病引起是由于包括生殖细胞在内所有细胞的存在同一基因突变造成的。另外，体细胞的基因突变后有三种可能： 1 ）突变细胞死亡、清除； 2 ）突变细胞增殖分化异常导致肿瘤细胞发生； 3 ）中性突变，就是基因突变后对细胞无害（不改变细胞的表型和功能）
（4）稀有性
人类的基因在群体中自然突变的概率是非常低的，大约在每代1万-100万个生殖细胞中出现1次突变（10-6-10-4/生殖细胞/位点/代）。例如， F Ⅷ（AHG）基因突变率为 2.0×10-5 ， 100万个生殖细胞中有20个细胞的AHG基因发生突变。
（5）重复性
重复性是指基因突变总是以一定的频率在某一基因位点上反复发生。例如，白化病基因可以在不同的个体重复出现。另外，有时可表现出种族性，如镰状红细胞贫血病只在黑人中出现。
（6）随机性
对不同的基因来讲，突变发生的几率是相同的，但对具体的个体来讲突变发生是随机的。
2.基因突变的类型
（1）碱基置换突变
碱基置换突变是指一个碱基被另一碱基取代而造成的突变。 可分为：转换（ transition ），碱基置换在嘌呤与嘌呤或嘧啶与嘧啶之间进行；颠换（ transversion ），为嘌呤与嘧啶之间的置换。
在自然界，转换突变多于颠换突变。由于碱基置换导致核苷酸顺序的改变，也就是密码子发生改变，这样对多肽链中氨基酸的顺序可能会产生影响，这样根据其影响的程度不同，可以把碱基置换突变分为下几种：
1）同义突变（ same-sense or synonymous mutation ）是指单个碱基置换前后的密码子所编码的氨基酸一样。例如，密码子 GCG 的第三位 G 被 A 取代而成 GCA ，使 mRNA 的原来密码子 CGC 被改变为 CGU ，但 CGC 和 CGU 都是精氨酸的密码子，所以，翻译成的氨基酸肽链没有任何变化。
2）错义突变（ missense mutation ）是指 DNA 分子中的核苷酸置换导致合成的多肽链中一个氨基酸被另一氨基酸所取代。
例如， mRNA 中密码子 AAA （赖）的第二个核苷酸 A 颠换为 C 时，则该密码子编码的氨基酸由赖氨酸改变为苏氨酸。错义突变的结果是产生异常蛋白质。但是，有些错义突变并不影响蛋白质或酶的生物活性，因而把不表现出明显的表型效应的突变称为中性突变（ neutral mutation ）。
3）无义突变（non-sense mutation）是指单个碱基置换导致终止密码子（UAG 、 UAA 、 UGA）提前出现。由于终止密码提前出现导致多肽链合成被提前终止，这样所产生的蛋白质会失去原来的活性和功能。如果无义突变发生在靠近 3' 末端处，表现为渗漏型，所谓渗漏型是指可能具有野生型多肽链的抗原性，但无生物学活性，不能发挥其正常功能。
4）终止密码突变（ termination codon mutation ）是指 DNA 分子中一个终止密码发生突变，成为编码氨基酸的密码子，使多肽合成到该停止的地方停不下来，结果肽链出现异常延长。也称为延长突变（ elongtion mutation ）。
5）抑制基因突变（ suppressor gene mutation ）是指一次基因突变的结果抑制了另一基因突变所产生的后果。例如： Hb Harlem 是β链第 6 位谷氨酸突变成缬氨酸，第 73 位天冬氨酸变成天冬酰胺；如果单纯 β6 谷氨酸 → 缬氨酸，就会造成患者死亡。由于存在β73位突变抑制了 β6 突变的有害效应。使患者临床表现变的较轻。
（2）移码突变和整码突变
移码突变（frame-shift mutation）是指 DNA 链上插入或丢失 1 个、 2 个甚至多个（但不包括三个或其倍数）碱基，导致在插入或丢失碱基部位以后的编码都发生了相应改变。如果插入或丢失部位的前后氨基酸顺序不变，称为整码突变（codon mutation ）。
二、单基因病的发病机制
单基因疾病中最常见的包括：代谢酶类缺陷疾病，血红蛋白结构异常和数量缺陷疾病，其他蛋白因子缺陷。
（一）代谢酶类缺陷
1.苯丙酮尿症
苯丙酮尿症是由于苯丙氨酸代谢途径中酶缺陷所致，因患儿尿液中排出大量苯丙酮酸等代谢产物而得名。另外， 患儿智力出现低下，皮肤、毛发色浅，汗和尿有特殊的鼠嗅味。它最早由 Fouling 于 1934 年发现的， 1953 年 Jervis 证实是由于苯丙氨酸羟化酶缺陷引起，此酶是催化苯丙氨酸转化为酪氨酸的代谢途径的关键酶。
患者的苯丙氨酸羟化酶缺陷的主要原因是基因的错义突变、缺失以及剪接突变造成的。 苯丙酮尿症可以分为两型：一是 苯丙氨酸羟化酶缺陷导致的 PKU 型（ 99% ），另一种是 BH4 型（ 1% ） 鸟苷三磷酸环化水合酶（ GTP-CH ）、6-丙酮酰四氢蝶呤合成酶（6-pts）和二氢生物蝶呤还原酶（DHPR）缺乏也可以造成苯丙酮尿症。苯丙酮尿症属常染色体隐性遗传。其发病率随种族而异，约为l/6000 ～ l/25000 ，我国发病率约为 1/16500 。它也是我国法定的新生儿进行普查的病种之一。
2.葡萄糖-6-磷酸脱氢酶（ G6PD ）缺陷
是最为常见的人类代谢酶类缺陷疾病，也是 红细胞内磷酸戊糖旁路缺陷的遗传性疾病之一。患者绝大多数平时没有什么临床症状，但在一定条件下，例如，服用氧化剂药物（ 磺胺药、注射维生素 K 、缺氧）、蚕豆口服或感染时，可以发生明显的溶血性贫血。临床上典型的病症包括持续性的新生儿黄疸（ neonatal jaundice ）和溶血性贫血（ hemolytic anemia ）。新生儿黄疸是一种见于男婴的遗传病。
G6PD 位于 Xq28 ，基因占有 18.5kb 的区域，由 13 个外显子和 12 个内含子组成，编码的成熟 mRNA 长度 2269bp ，翻译出的肽链约 59Kd 。有活性的蛋白是由 2 个或 4 个相同的亚基组成。目前发现 G6PD 缺陷有 400 多种，其中 56 种变异的酶切位点已经被查出，大多数突变位点涉及氨基酸替代引起酶的活性部分丧失。而且突变位点集中于酶蛋白的羧基端，介于 362-446 号氨基酸之间；相反，临床症状较轻的患者常常是由于突变发生于氨基端，对 G6PD 酶的活性影响较小。如果酶活性完全失去，将不可能正常发育到出生。
G6PD 是一个典型的看家基因，即在绝大部分组织的细胞中都需要，它催化葡萄糖 -6- 磷酸分子的脱氢反应，使氧化型的 NAPD ++ 还原为 NAPDH ，是人类磷酸戊糖代谢途径的第一步反应。但在红细胞内，这个过程是唯一的 NAPDH 产生途径。如果 G6PD 缺陷，使红细胞对氧化物的清除能力丧失，产生自由基，在清除自由基时消耗了还原性谷胱甘肽（ GSH ）又不能及时补充；使 GSH 进一步减少。 GSH 减少时，患者 Hb 中的巯基易被氧化，红细胞膜变的极其不稳定，造成溶血症状。所以 G6PD 缺陷病人会对氧化性的药物敏感。 G6PD 缺陷病人药物敏感种类超过 50 种，其中包括常见的阿司匹林、氯喹、奎宁、磺胺嘧啶、氯霉素等。
（二）血红蛋白病
1.血红蛋白分子及其基因
人类 Hb 由 4 条珠蛋白链组成，但珠蛋白肽链有四种类型，分别是α、β、δ和γ肽链。正常成年人 Hb 是由两条α和两条β 链，可以写成 α2β2 ；每条珠蛋白链由 140 多个氨基酸链组成，并携带一个血红素（ heme ）基团。 Hb 的功能是携带和运输氧气，把氧气从肺泡运输到组织。
人类的珠蛋白基因分别位于 11p 和 16p 。其中 11p （短臂末端）上分布有类β链基因家族的 5 个功能基因（ε、Gγ、A γδ和β）和1个假基因，约有 25Kb 的区域，编码β、δ、γ 肽链。 16p 聚集2个α 基因（α1 、α2 ）和ζ基因，以及 2 个假基因，约有 60Kb 的区域，编码 α 肽链。所有的珠蛋白基因结构也都非常近似，均由 3 个外显子组成，中间插有 2 个内含子。
2.Hb 病结构变异的分子机制
Hb 基因的任何变异都可能导致蛋白结构和功能改变，这也是导致 Hb 病的原因。目前已发现的珠蛋白的单核苷酸突变大约有 600 多个类型。在这些突变中，多数不会影响 Hb 的功能和人类健康，但有些突变可以导致 Hb 变异性疾病。从分子水平上分析， Hb 病结构变异产生的机制可能有以下几种：
Hb 病结构变异产生的机制
| 类 型 | 机 制 | 表 型 |
| 错义突变 | β链基因第 6 位密码子 CTT → CAT ，结果谷→ 缬 | HbS |
| 无义突变 | β链基因第 145 位密码子 UAU → UAA （终止码）使β链在C端少了2个氨基酸 | Hb Mckees Rocks |
| 终止码突变 | α链基因UAA→GAA（谷）使C端多31个aa | Hb seal Rocks |
| 启动子突变 | β链基因有-28位AG使TATA框突变 | β链生成障碍性贫血 |
| 移码突变 | α链基因第138位密码子UCC的第3个碱基C缺失导致后面碱基重新编码，肽链延长到 147位 | Hb Wayne |
| 融合突变 | α和β发生错误联合和不等交换使α链的N端部分与β链的C端部分融合在一起，形成αβ链。 | Hb Lepone |
3.Hb 变异性疾病
是指在血红素结合区域或构象维持的关键氨基酸残基，以及亚单位结合位点发生氨基酸替代的基因突变，导致 Hb 对氧的亲和力改变。
（1）不稳定血红蛋白引起的贫血
是由于血红素不能稳定的结合到珠蛋白的血红素口袋，使无血红素的珠蛋白在红细胞内沉积。轻者会使红细胞过早地被网状内皮系统清除，重者直接引起溶血，结果使患者出现程度不同的贫血表现。
发生机制是只要能造成血红素口袋周围的氨基酸替代或缺失的基因突变，都能影响血红素和珠蛋白的结合能力。目前，已经有 100 多种不稳定 Hb 被发现，其中 3/4 发生在珠蛋白 β 基因。
（2）高铁血红蛋白血症（HbM）
临床表现是先天性家族性紫绀出现。其发病机制是由于血红素口袋周围的氨基酸残基被替代，产生多出一个配位键，使血红素中正常二价铁离子过快变成三价铁离子，处于脱氧状态而不能结合氧。
目前发现，有 7 种珠蛋白突变可以导致 HbM ，其中 6 种涉及组氨酸残基被酪氨酸所取代。酪氨酸侧链上的羟基能与二价铁离子形成稳定的配位键，形成三价铁的高铁 Hb ，氧亲和力下降，失去携氧功能，产生紫绀。一种是 β 链 67 位缬氨酸被谷氨酸取代 ，谷氨酸的游离羧基可与血红素二价铁离子结合，成为三价铁稳定状态，产生高铁 Hb 。
（3）伴有红细胞增多的异常血红蛋白病（ abnormal hemoglobin syndrome with erythrocytosis ）
这是由于 Hb 对氧亲合力升高，使氧离曲线左移，不易释放出氧，造成组织缺氧，缺氧刺激红细胞生成增加，导致代偿性的红细胞增多症。
能引起 Hb 对氧亲合力升高的珠蛋白基因突变有 50 余种，但常见的： ① 位于 α1β2 （或 α2β1 ）亚基接触面的氨基残基发生了取代； ② β 珠蛋白肽链羧基端和 2，3-DPG 结合位点发生了氨基酸取代； ③ 血红素口袋四周的氨基酸被取代。这三种基因突变都导致 Hb 构象变化和对氧亲合力升高，氧离曲线左移。
（4）镰状细胞病
镰状细胞病是指 β 珠蛋白链第 6 位缬氨酸被谷氨酸替代，产生 HbS 。纯合子突变患者在相对缺氧时， HbS 可形成高分子的束状结构，并且合并为形成长棒状纤维束，使红细胞膜出现变形成为镰状。镰状细胞容易被脾脏所破坏，使血液的粘滞度加大和加重缺氧。患者可出现腹痛和肌肉疼痛，在后期出现病变组织坏死。杂合子突变时，红细胞寿命可以是正常的，因为 RBC 内 HbS 含量低于 40% ，但在严重低氧时红细胞也会发生镰状化。
4.Hb 表达减少或缺失 - 地中海贫血
地中海贫血的发生机制主要是珠蛋白基因发生缺陷或缺失，使某种珠蛋白肽链的合成受到抑制所引起的一组遗传性贫血。根据受影响的珠蛋白不同，可分为：α和β地中海贫血。同样，如果是杂合子缺陷，称为α+ 和β+ 地中海贫血；如果是纯合子缺陷，称为α0和β0地中海贫血。
β地中海贫血发生的分子机制
| 类型 | 机 制 | 表 型 | 易患群体 |
| 缺失 | |||
| 融合蛋白 | Hb Lepore:7K 缺失→融合蛋白 | β0 , β Lepore | 意大利 |
| 珠蛋白基因缺失 | 619bp 缺失 | β0 | 印度 |
| RNA 合成缺失 | |||
| RNA 剪接缺失 | 内含子 1 剪接受位异常 AG → GG | β0 | 非洲 |
| 启动子突变 | ATA 框突变： ATAA → GTAA | β+ | 日本 |
| RNA 加帽位点异常 | RNA 加帽位点突变： A → C | β+ | 亚洲 |
| 多 A 信号缺陷 | AATAAA → AACAAA | β+ | 非洲 |
| 无功能 RNA | |||
| 无义突变 | 密码子 39 ： CAG → UAG | β0 | 地中海 |
| 密码子 16 的单bp 缺失： UGG GGC AAG | |||
| GUG AAG → UGG GCA AGG UGA （终止） | β0 | 印度 | |
| 改变剪接的编码区突变 | |||
| 中性突变 | 密码子 24 ： GGU → GGA | β+ | 非洲 |
| 错义突变 | 密码子 26 ： GAG → AAG | β+ | 东南亚 |
（三）其他基因缺陷导致的疾病
上个世纪后期，人们对基因病的研究从表型 - 基因型 - 基因克隆路线转移到疾病 - 基因克隆 - 分析的研究策略，其中重要的原因是连锁不平衡为基础的反向遗传学方法提出。尽管以这种方法克隆的基因很可能难以判断其分子机制，但明确提示某一种疾病与此基因的突变密切相关的。比较典型的病例有以下三种：
1.唐氏肌营养不良症（ Duchenne muscular dystrophy, DMD ）
DMD 大多发生于男性，在欧洲男性的发病率为 1/3,500，具有典型的 X 染色体连锁的特征，但我们无法从患病的肌肉样本中获得异常表达或突变产物的信息。但从细胞遗传学研究发现部分病例的 Xp21 位点上存在缺失的特征，然后，对这一位点进行基因克隆，发现该基因含有 100 个外显子，可编码一个 3685 个氨基酸的蛋白质，这蛋白质在横纹肌、平滑肌和心肌细胞都有表达，是细胞膜内侧的膜蛋白（肌营养素， dystrophin ）。从蛋白结构和位置判断，肌营养素的功能可能是通过和膜蛋白结合，维持肌细胞的完整性，但真正的作用机理一直不清楚。
多数 DMD 病例是由于 DMD 基因的缺失（ 65% ）引起的，所以推测这种大型基因容易受到染色体重排的影响而失活。
2.囊性纤维化（ Cystic fibrosis ）
囊性纤维化是欧美地区最常见的隐性致死性遗传病 （ 1/2000 的新生儿） 。在基因克隆之前，已经知道在上皮细胞内， cAMP 介导氯离子转运，但 cAMP 的正常依赖于蛋白激酶（ PKA ）。这基因的克隆是通过连锁分析后，决定其基因位于 7 号染色体 7p13 位点上。这一基因区域有 250kb ，转录一个 6.5kb 的 mRNA 。最后，确定这基因位点是由于 70% 的患者的 7p13 基因 7 号外显子含有 3 个碱基的缺失，造成蛋白质 △F508 缺失。在转染野生型的全长基因可以使氯离子通道恢复正常。基因被命名为 CFTR （ cystic fibrosis transmembrane conductance regulator ），是一个 PKA 活化的离子通道。
3.亨廷顿氏病（ Huntington's disease，HD）
亨廷顿氏病是一种进行性的基底神经节和皮层退变性疾病，患者表现舞蹈病、运动协调障碍，痴呆和不同的心理障碍，属常染色体显性遗传。
通过连锁分析 HD 证明基因位于 4p16.3 （近端粒区），是一个全长 210kb 的大基因，含有 67 个外显子，称为 IT15 。其编码的蛋白产物 MW348000 。从克隆到的 HD 基因中发现谷氨酰胺密码子的重复次数增加，而且是一种为数不多的动态突变（ dynamic mutation ）方式。编码谷氨酰胺的不稳定密码子位于 5` 端。除 HD 基因突变的方式独特外，另外一个注意点是虽然此病的基因被克隆并加以证实，但其基因的功能，它所编码的蛋白质的结构和功能却仍然未知。