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药品卫生检验方法（之二）

作者：admin发布时间：2011-06-30 08:27浏览：次

【有效性】有效

【法规名称】药品卫生检验方法（之二）

【颁布部门】卫生部

【颁布日期】1984年10月31日

【实施日期】1984年10月31日

【正　　文】

（六）供试品检验报告：

大肠杆菌ＩＭＶｉＣ试验的模式反应，在一般情况下应为“＋＋－－”或将“－＋－－”也包括在内，共代表了绝大多数大肠杆菌（占９９％）的实际反应结果，因而受到了国际上的广泛承认，并将其列为大肠杆菌的常规鉴别ＩＭＶｉＣ反应公式。但个别大肠杆菌的ＩＭＶｉＣ反应，也可能出现“＋－－－”和“＋＋－＋”等等异常现象。由于这种异常反应出现的频率极少，没有普遍性的代表意义，因而在分类鉴别和统计学上，可以忽略不计。

沙门氏菌检验程序。

      沙门氏菌检验程序图解                    －－－－－                    ｜供试品｜                    －－－－－                        ↓稀释                    －－－－－                    ｜供试液｜                    －－－－－                        ↓                －－－－－－－－－－                ｜胆盐乳糖增菌培养｜                －－－－－－－－－－                ３７°↓１８—２４小时                －－－－－－－－－－                ｜ＳＳ与ＥＭＢ平板｜                －－－－－－－－－－                ３７°↓１８—２４小时                  －－－－－－－                  ｜三糖铁琼脂｜                  －－－－－－－                ３７°↓１８—２４小时    －－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－    ｜      ｜      ｜                              ｜  －－－  －－－  －－－                  －－－－－－－－－－－－－  ｜动｜  ｜镜｜  ｜凝｜                  ｜    一般生化反应      ｜  ｜  ｜  ｜  ｜  ｜集｜                  ｜－－－－－－－－－－－｜  ｜  ｜  ｜  ｜  ｜试｜                  ｜葡乳麦甘蔗靛硫尿赖脱氰｜  ｜力｜  ｜检｜  ｜验｜                  ｜萄  芽露  基化素氨羧化｜  ｜  ｜  ｜  ｜  ｜  ｜                  ｜糖糖糖醇糖质氢酶酸酶钾｜  －－－  －－－  －－－                  －－－－－－－－－－－－－    ｜      ｜      ｜                              ｜    －－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－                        ↓                    －－－－－                    ｜报  告｜                    －－－－－

取上述增菌培养物，划线接种于ＳＳ琼脂和ＥＭＢ琼脂平板各一个（划线时，适当增加ＳＳ琼脂平板的涂抹量２—３环，可提高阳检率），置３７°培养１８—２４小时。凡沙门氏菌，在ＳＳ和ＥＭＢ琼脂平板上，菌落一般无色透明或半透明，圆形，周边整齐，表面光滑湿润，在ＳＳ琼脂平板上中心有时呈黑褐色。如有上述疑似菌落，应选取２—３个分别进行纯培养，按下列方法鉴别。

取上述疑似菌落的纯培养物、分别接种至葡萄糖、乳糖、麦芽糖、甘露醇和蔗糖等发酵管培养基，并接种蛋白胨水和尿素培养基，经３７°培养２—５天，观察结果。沙门氏菌一般生化反应和动力检查，绝大数应为、葡萄糖＋，乳糖－，麦芽糖＋，甘露醇＋，蔗糖－，靛基质－，硫化氢＋，尿素酶－，动力＋。当一般生化试验符合时，应做赖氨酸脱羧酶及氰化钾试验。沙门氏菌赖氨酸脱羧酶试验＋，氰化钾－。系统生化试验，详见表２：肠杆菌科各菌属的生化特性鉴别表。

取上述疑似菌落的ＴＳＩ琼脂培养物少许，与沙门氏菌Ａ—Ｆ多价Ｏ血清作玻片凝集试验，并以生理盐水作对照试验。若凝集试验为阴性反应时，应将菌苔制成浓菌液在１００℃水浴中保温３０分钟后再进行Ａ—Ｆ多价Ｏ血清凝集试验。将反应结果，结合生化试验，判定之。

绿脓杆菌检验程序（见次页）。

增菌后，如有绿脓杆菌生长，液体表面多有一层薄菌膜，培养液常呈黄绿色或蓝绿色。

凡绿脓杆菌在十六烷三甲基溴化铵平板上或在明胶十六烷三甲基溴化铵平板上其菌落扁平无定形周边扩散或略有蔓延，表面湿润，菌落呈灰白色，菌落周围培养基常扩散有水溶性蓝绿色色素，在含有明胶平板上除上述形态外，菌落周围呈现明胶液化环。

（四）生化试验

挑取纯培养物分别接种在专供测定绿脓菌素用的ＰＤＰ琼脂斜面培养基上，置３７°培养２４小时后，在试管内加氯仿３—５毫升，充分振摇，将琼脂斜面培养物中的待检色素提取在氯仿液里。待氯仿提取液呈蓝绿色时，用吸管将其移到另一试管中，并在该液中加１Ｎ的盐酸１毫升左右，振摇后，静置片刻，如果在上层的盐酸液内出现粉红色时，即为阳性，表明被检菌的培养物中有绿脓菌素存在。如阴性，应继续将纯培养物接种在ＰＤＰ琼脂斜面上，３７°培养２—３天后，检查有无绿脓杆菌素产生。

４．明胶液化试验：

（五）供试品检验报告：

金黄色葡萄球菌检验程序。

（二）分离培养：

（四）染色镜检：

（六）血浆凝固酶试验

凡从上述平板上分离的疑似菌落，经染色镜检证明为革兰氏阳性葡萄状球菌，并证实可发酵甘露醇产酸，血浆凝固酶试验阳性者，应报告供试品检出金黄色葡萄球菌。