提取分离方法
作者：admin发布时间：2013-06-20 13:28浏览：
次
自植物中提取苷类物质，一般都是采用水或醇进行抽提。在提取时首先必须明确提取的目的要求，即要求提取的是原生苷、次生苷，还是苷元，然后，根据要求进行提取，其提取方法是有差别的。由于植物体内有水解酶共存，在提取过程中易使苷类物质分解，因此在提取原存在形式的苷时，必须抑制或破坏酶的活性。一般常用的方法是在中药中加入一定量的碳酸钙，或采用甲醇、乙醇或沸水提取，同时在提取过程中还须尽量避免与酸和碱接触，以免苷类水解，如不加注意，则往往得到的不是原生苷，而是已水解失去一部分糖的次生苷，或甚至是苷元。
各种苷类分子中，由于苷元结构的不同，所连接糖的数目和种类也不一样，很难有统一的提取方法，如果用不同极性的溶剂顺次提取，则在每一提取部分中，都可能有苷的存在。以下是最常见的提取方法：
![src=]()
,,,0.0.0.0
91651,217,苷类水解所得到的各种单糖和低聚糖的结构大多数是已知的，只要与各种已知糖的标准品对照就可加以鉴定。但由于糖的水溶性很大，不易获得结晶，有些物理常数无法测定，给印证工作带来困难。以前多用化学方法制成衍生物，再作分离鉴定，步骤多，工作量大。而现在各种色谱技术的应用，给糖类的鉴定带来了极大的方便。
(一)纸色谱
(二)薄层色谱
(三)气相色谱
(四)离子交换色谱
(五)液相色谱,,,0.0.0.0 91652,217,要测定糖链的结构主要是解决三个问题：单糖的组成、糖与糖的连接位置和顺序、苷键的构型。
(一)分子量的测定
苷的分子量测定目前大多采用质谱法。但由于其极性大导致热挥发性差，电子轰击法(EI)和化学电离(CI)常不能得到理想的结果，一般采用场解吸(FD)、快原子轰击(FAB)、电喷雾(ESI)等方法获得[M+H]+、[M+Na]+等准分子离子峰。
(二)单糖的鉴定
首先要了解苷中糖链由哪些单糖所组成，各种单糖之间的比例如何。一般是将苷键全部酸水解，然后用纸色谱检出单糖的种类。经显色后用薄层扫描仪求得各种糖的分子比。单糖的定性定量也可以通过苷全甲基化并水解后得到的甲基化单糖的气相色谱测定，但需要各种各样的甲基化单糖作标准品。
(三)单糖之问连接位置的确定
将苷全甲基化，然后水解苷键，鉴定所有获得的甲基化单糖，其中游离的一OH的部位就是连接位置。水解要尽可能温和，否则会发生去甲基化反应和降解反应。
(四)糖链连接顺序的确定
(五)苷键构型的决定,,,0.0.0.0 91653,217,![src=]()
苦杏仁苷是一种氰苷，易被酸和酶所催化水解。水解所得到的苷元α-羟基苯乙腈很不稳定，易分解生成苯甲醛和氢氰酸。其中苯甲醛具有特殊的香味。通常将此作为鉴别苦杏仁苷的方法。其具体操作为：取本品数粒，加水共研，发生苯甲醛的特殊香气。此外，苯甲醛可使三硝基苯酚试纸显砖红色，此反应也可用来鉴定苦杏仁苷的存在。具体操作为：取苦杏仁数粒，捣碎，称取约0.1g，置试管中，加水数滴使湿润，试管中悬挂一条三硝基苯酚试纸，用软木塞塞紧，置温水浴中，10分钟后，试纸显砖红色。
由于苦杏仁苷易被酸、酶水解，故贮存和运输中应注意通风、干燥、杀酶，并避免与酸接触。,,,0.0.0.0 91654,217,![src=]()
,,,0.0.0.0
91655,217,![src=]()
,,,0.0.0.0
91656,217,![src=]()
,,,0.0.0.0
91657,217,成分包括蒽酮及其不同程度的还原产物。按母核可分为单蒽核及双蒽核，按氧化程度又可分为氧化蒽酚、蒽酮、蒽酚及蒽酮的二聚物。
(一)单蒽核类
(二)双蒽核类,,,0.0.0.0 91658,217, 醌类化合物如无酚羟基，则近乎无色。随着助色团酚羟基的引入而表现出一定的颜色，引入的助 色团越多，颜色则越深。天然醌类多为有色晶体。苯醌及萘醌多以游离状态存在，而葸醌类则往往结 合成苷，存在于植物体中。,,,0.0.0.0 91659,217,游离的醌类多具升华性，小分子的苯醌类及萘醌类具有挥发性，能随水蒸气馏出，可据此进行提 取、精制。,,,0.0.0.0 91660,217,游离醌类多溶于乙醇、乙醚、苯、三氯甲烷等有机溶剂，微溶或不溶于水。而醌类成苷后，极性 增大，易溶于甲醇、乙醇、热水，几乎不溶于苯、乙醚等非极性溶剂。,,,0.0.0.0 91661,217, 蒽醌类衍生物多具有酚羟基，故具有酸性，易溶于碱性溶剂。分子中酚羟基的数目及位置不同，酸性强弱也不一样。其规律如下。
(1)带有羧基的蒽醌类衍生物酸性强于不带羧基者，一般蒽核上羧基的酸性与芳香酸相同，能溶于NaHC0，水溶液。
(2)如羟基位于苯醌或萘醌的醌核上则属插烯酸结构，酸性与带羧基的葸醌类衍生物类似。
(3)由于α-羟基蒽醌中的一0H与C=0形成分子内氢键，故β-羟基蒽醌的酸性强于0t一羟基葸醌衍生物。α-羟基葸醌的酸性很弱，不但较苯酚及β一羟基蒽醌弱，且不及碳酸第一步解离时的酸性，故不溶解于碳酸氢钠及碳酸钠溶液。
(4)羟基数目越多，酸性越强。无论a位或／3位，随着羟基数目的增加，其酸性都有一定程度的增加。如l，5与1，4一二羟基蒽醌虽各自均能形成氢键，但酸性仍有增加。1，8一二羟基蒽醌因两个羟基中只有一个与羰基形成氢键，故酸性大大增强，较碳酸第二步解离时的酸性高出近百倍，所以大黄酚能溶于沸碳酸钠溶液。,,,0.0.0.0 91662,217,"
各种苷类分子中，由于苷元结构的不同，所连接糖的数目和种类也不一样，很难有统一的提取方法，如果用不同极性的溶剂顺次提取，则在每一提取部分中，都可能有苷的存在。以下是最常见的提取方法：
(一)纸色谱
(二)薄层色谱
(三)气相色谱
(四)离子交换色谱
(五)液相色谱,,,0.0.0.0 91652,217,要测定糖链的结构主要是解决三个问题：单糖的组成、糖与糖的连接位置和顺序、苷键的构型。
(一)分子量的测定
苷的分子量测定目前大多采用质谱法。但由于其极性大导致热挥发性差，电子轰击法(EI)和化学电离(CI)常不能得到理想的结果，一般采用场解吸(FD)、快原子轰击(FAB)、电喷雾(ESI)等方法获得[M+H]+、[M+Na]+等准分子离子峰。
(二)单糖的鉴定
首先要了解苷中糖链由哪些单糖所组成，各种单糖之间的比例如何。一般是将苷键全部酸水解，然后用纸色谱检出单糖的种类。经显色后用薄层扫描仪求得各种糖的分子比。单糖的定性定量也可以通过苷全甲基化并水解后得到的甲基化单糖的气相色谱测定，但需要各种各样的甲基化单糖作标准品。
(三)单糖之问连接位置的确定
将苷全甲基化，然后水解苷键，鉴定所有获得的甲基化单糖，其中游离的一OH的部位就是连接位置。水解要尽可能温和，否则会发生去甲基化反应和降解反应。
(四)糖链连接顺序的确定
(五)苷键构型的决定,,,0.0.0.0 91653,217,
由于苦杏仁苷易被酸、酶水解，故贮存和运输中应注意通风、干燥、杀酶，并避免与酸接触。,,,0.0.0.0 91654,217,
(一)单蒽核类
(二)双蒽核类,,,0.0.0.0 91658,217, 醌类化合物如无酚羟基，则近乎无色。随着助色团酚羟基的引入而表现出一定的颜色，引入的助 色团越多，颜色则越深。天然醌类多为有色晶体。苯醌及萘醌多以游离状态存在，而葸醌类则往往结 合成苷，存在于植物体中。,,,0.0.0.0 91659,217,游离的醌类多具升华性，小分子的苯醌类及萘醌类具有挥发性，能随水蒸气馏出，可据此进行提 取、精制。,,,0.0.0.0 91660,217,游离醌类多溶于乙醇、乙醚、苯、三氯甲烷等有机溶剂，微溶或不溶于水。而醌类成苷后，极性 增大，易溶于甲醇、乙醇、热水，几乎不溶于苯、乙醚等非极性溶剂。,,,0.0.0.0 91661,217, 蒽醌类衍生物多具有酚羟基，故具有酸性，易溶于碱性溶剂。分子中酚羟基的数目及位置不同，酸性强弱也不一样。其规律如下。
(1)带有羧基的蒽醌类衍生物酸性强于不带羧基者，一般蒽核上羧基的酸性与芳香酸相同，能溶于NaHC0，水溶液。
(2)如羟基位于苯醌或萘醌的醌核上则属插烯酸结构，酸性与带羧基的葸醌类衍生物类似。
(3)由于α-羟基蒽醌中的一0H与C=0形成分子内氢键，故β-羟基蒽醌的酸性强于0t一羟基葸醌衍生物。α-羟基葸醌的酸性很弱，不但较苯酚及β一羟基蒽醌弱，且不及碳酸第一步解离时的酸性，故不溶解于碳酸氢钠及碳酸钠溶液。
(4)羟基数目越多，酸性越强。无论a位或／3位，随着羟基数目的增加，其酸性都有一定程度的增加。如l，5与1，4一二羟基蒽醌虽各自均能形成氢键，但酸性仍有增加。1，8一二羟基蒽醌因两个羟基中只有一个与羰基形成氢键，故酸性大大增强，较碳酸第二步解离时的酸性高出近百倍，所以大黄酚能溶于沸碳酸钠溶液。,,,0.0.0.0 91662,217,"