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发布时间:2011-06-29 09:17浏览:
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HIV复制是一特殊而复杂的过程,当HIV利用gp120和gp41与宿主细胞膜有效融合,核衣壳进入细胞质内脱壳,释放其核心RNA进行复制。病毒的反转录酶以病毒RNA为模板,以宿主细胞的tRNA为引物,经病毒反转录作用产生互补股。DNA,构成DNA:RNA中间体。中间体的RNA被RNaseH水解去除,在由负股DNA复制正股DNA而组成d-DNA.此时基因组的两端形成LTR序列,并由胞质移行到胞核内,在病毒整合酶的作用下,病毒基因组整合于细胞染色体中形成前病毒。前病毒以非活化方式可长期潜伏于宿主细胞内,随细胞分裂而进入子代细胞。在一定条件下,当相关因素刺激前病毒活化而进行自身转录时,LTR有启动和增强转录的作用。
在宿主细胞的RNA多聚酶II作用下,病毒DNA转录成RNA,其中有些RNA经拼接形成m-RNA,在细胞核糖体上转译成子代病毒的结构蛋白和调节蛋白;另一些RNA经加帽加尾则可作为子代病毒基因组RNA,并与结构蛋白装配成核衣壳,成熟并通过细胞膜时获得包膜,组成完整的有感染性的子代病毒,以出芽方式至细胞外。
病毒的变异
HIV基因组可发生变异,从而使分离到的HIV株间有不同的生物学特性。HIV变异较多集中于包膜糖蛋白env基因和调节基因nef.基因核苷酸序列的变异导致编码氨基酸的改变。根据enz,基因序列的差异将目前全球流行的HIV-I分为A、B、C等8个亚型,在非洲主要流行的是A、C、D、E,我国云南省感染者丰要为B和C亚型。全球流行以C和E亚型为主,估计病毒env基因核苷酸变异概率每年每个位点约0.1%,其变异率与流感病毒相似。
培养特性
将病人自身外周血或骨髓中淋巴细胞经PHA刺激48—72h做体外培养(培养液中加IL2)1—2周后,病毒增殖可释放至细胞外,并使细胞融合成多核巨细胞,最后细胞破溃死亡。亦可用传代淋巴细胞系如HT-H9、Molt-4细胞做分离及传代。
HIV动物感染范围窄,仅黑猩猩和长臂猿,一般多用黑猩猩做实验。用感染HIV细胞或无细胞的HIV滤液感染黑猩猩,或将感染HIV黑猩猩血液输给正常黑猩猩都感染成功,连续8个月在血液和淋巴液中可持续分离到HIV病毒颗粒,在3—5周后查出HIV特异性抗体,并继续维持一定水平。但无论黑猩猩或长臂猿感染后都不发生疾病。
抵抗力
HIV对热敏感。56℃30min灭活,冻干血制品需68℃72h方能保证污染HIV的灭活,WHO规定HIV消毒与彻底灭活必须煮沸(100℃)20min,或高压蒸汽灭菌20min.—70℃冰冻时,如果不加稳定剂病毒将失去活性,当加入50%胎牛血清或35%山梨醇—70℃冰冻3个月尚可保持活性。对消毒剂和去污剂亦敏感,使用化学消毒剂0.2%次氯酸钠、0.15漂白粉、70%乙醇、35%异丙醇、50%乙醚、0.3%H2O2、0.5%来苏尔处理5min均能灭活病毒,1%NP-40和0.5%Trition-x-100能灭活病毒而保留抗原性。对紫外线、γ射线有较强抵抗力。