第二十二章 常用分子生物学技术

第二十二章   常用分子生物学技术

一、目的和要求

掌握PCR技术的概念及原理。掌握核酸分子杂交技术的概念及原理。掌握印迹技术和探针的概念，熟悉分子杂交技术的种类。了解核酸序列分析技术。

二、重点与难点

重点：

1. 掌握分子杂交、印迹技术、探针的概念。熟悉分子杂交技术的种类。了解其应用。

2. 掌握PCR技术的工作原理及基本反应步骤。了解PCR技术的主要用途。了解反转录PCR技术、原位PCR技术和实时PCR技术的基本原理。

3. 了解化学裂解法和DNA链末端合成终止法的基本原理。

难点：

DNA链末端合成终止法测序的基本原理。

三、讲授内容和要点

1. 分子杂交与印迹技术。

2. PCR技术的原理与应用。

3. 核酸序列分析

四、英文词汇

nucleic acid hybridization  核酸分子杂交                                probe  探针

polymerase chain reaction，PCR  聚合酶链反应           RT-PCR  反转录PCR

Southern blotting  DNA 印迹技术                                           Northern blotting  RNA 印迹技术

real time PCR  实时PCR                                                              DNA sequencing  DNA 测序

五、思考题

1. 简述PCR技术的概念、工作原理及应用。

2. 简述分子杂交Southern bloting印迹技术概念、工作原理及应用。