第十八章 基因工程

第十八章   基因工程

一、目的和要求

掌握DNA克隆及基因工程的概念，熟悉限制性内切核酸酶，了解基因工程常用的工具酶。掌握载体、目的基因。掌握基因工程的基本步骤。

二、重点和难点

重点：

1. 掌握DNA克隆及基因工程的概念。掌握限制性核酸内切酶的概念、了解识别位点及切割产生的末端。了解基因工程常用的工具酶。掌握目的基因的概念及种类。掌握基因载体的定义、常用的基因载体的类型。

2. 掌握基因工程的基本流程。熟悉目的基因的获取途径。熟悉克隆载体的选择和构建。熟悉外源基因与载体的连接方式。了解重组DNA导入受体菌的方式。熟悉重组体的筛选方法。掌握插入失活的概念和α-互补的筛选方法。了解克隆基因的表达。了解原核表达体系及真核表达体系。

3. 了解基因工程与医学的关系。

难点：

1. 外源基因与载体连接的方法。

2. 重组体的筛选。

三、讲授内容及要点

1. 基因工程概述：重组DNA技术概念，基本过程。

2. 基因工程的常用工具：限制性核酸内切酶，其他工具酶，克隆载体，表达载体。

3. DNA克隆：基因工程的基本步骤，DNA克隆的用途。

4. 基因工程与医学：重组DNA技术在生物学医学中的应用。

四、英文词汇

clone  克隆                                                                                     molecular cloning  分子克隆

recombinant DNA technology  重组DNA技术          DNA cloning  DNA克隆

gene engineering  基因工程                                                    gene cloning  基因克隆

restriction endonuclease  限制性核酸内切酶                  cloning vector  克隆载体

plasmid  质粒                                                                                 multiple cloning sites  多克隆位点

expression vector  表达载体                                                   host cells  宿主细胞

transformation  转化                                                                transfection  转染

transduction  转导                                                                          infection  感染

genomic library  基因组文库                                                   cDNA library  cDNA文库

五、思考题

1. 什么是重组DNA 技术？概述其基本过程。

2. 试述几种获取目的基因的方法。

3. 重组DNA 技术中常用到哪几种工具酶，各有何用途？

4. 说出几种重组DNA 技术中常用的载体。