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血红蛋白电泳

作者:admin发布时间:2012-11-01 19:29浏览:

 血红蛋白电泳介绍:
  
  各种血红蛋白的等电点不同的特点,在一定pH缓冲液中所带的正、负电荷不同,经电泳后各血红蛋白的移动方向不同。

血红蛋白电泳正常值:
  
  电泳法: HbA95%、HbA21.1%~3.2%、HbA32%~3%

  Singer法:HbF<4%

血红蛋白电泳临床意义:
  
  一、HbA2升高,可见于维生素B12或叶酸缺乏所致的巨细胞贫血、部分轻型珠蛋白生成障碍性贫血;

  二、HbA2降低:见于缺铁性贫血;

  三、HbF升高:可见于纯合子β珠蛋白生成障碍性贫血、杂合子β珠蛋白生成障碍性贫血和正常新生儿。

  四、其他:

  1.主要成分为HbS,而无HbB,可见于镰形细胞血红蛋白病;

  2.HbS、HbF和HbA2轻度增加,而HbA极少或消失,结合调查可诊断为HbS-β-海洋性贫血,多见于地中海地区。

  3.除HbS外,含有10%-30%HbA和轻度增高的HbF及HbA2,也可考虑HbS-β-海洋性贫血;

  4.HbS占20%-30%,HbA占65%-75%,并含有正常的HbF和HbA2,可诊断为HbS-α-海洋性贫血;

  5.HbA消失,HbC占总血红蛋白的28%-44%,可诊断为血红蛋白病,多见于黑人,血片中可见较多的靶形细胞;

  6.有HbS,还出现HbD,血片中有靶形细胞,可诊断为血红蛋白D病,我国北方较多见;

  7.电泳结果出现HbE,可诊断为血红蛋白E病,主要见于东南亚、印度等,我国以广东南部多见。

血红蛋白电泳注意事项:
  
  蜡酸纤维薄膜电泳直接比色法

  试剂:同醋酸纤维素膜微量血红蛋白电泳。

  操作:

  (1)将醋酸纤维素膜作1/3切开(4cm×8cm)漫于TEB缓冲液中,10min以上。

  (2)取出醋酸纤维素膜用滤纸吸去多余的水份。以Hb吸管吸取100g/L溶血液10μl均匀涂于玻璃推片下缘,在距薄膜阴极端1.5~2.0cm处于无光泽面点样。每个标本同时做两份。

(3)电泳:缓冲液同微量血红蛋白电泳。电压180V,时间40min~1h。(以各区带明显分开为宣)电泳后交换电极,缓冲液可反复使用。

  (4)洗脱与定量 分别剪下HbA,HbA2和相当于HbA2大小的对照区带。如有异常Hb区带(HbX)也同时剪下,各自放在相应的试管中。于HbA管中加TEB缓冲液10ml,其余各管加TEB缓冲液2ml,浸泡30min,时时振摇。待完全洗脱后。将

  洗脱液混匀,用721分光光度计,波长413nm。以空白调零,测各管吸光度。

  (5)计算:

  如有异常HbX,则计算HbA2%时,分母中还要加:HbX吸光度。

  

 

  HbX%=

 

血红蛋白电泳检查过程
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