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血液葡萄糖注意事项

作者:admin发布时间:2012-11-01 19:24浏览:

 血液葡萄糖注意事项:
  
  (1)葡萄糖邻甲苯胺(O~TB)法测定:

  ①除葡萄糖外,其他糖在反应过程中亦能产生有色化合物,它们吸光度比率分别为:葡萄糖=1.00;果糖=0.06;甘露糖=0.96;半乳糖=1.42;蔗糖=0.16;麦芽糖=0.09;乳糖=0.39;木糖=0.12。但是,在这些糖中葡萄糖、果糖和半乳糖存在于正常人血清,而后者在正常人血液中含量甚微,不影响实际测定结果。

  ②测定液的显色强度与反应条件有关,邻甲苯胺的批号、邻甲苯胺试剂的新、老(如试剂配制后过久,颜色变浅)以及加热温度和加热时间等都会影响显色强度。因此,测定管,标准管、空白管的加热时间与温度必须完全一致。每批测定管数不宜过多,以便能较好地控制反应条件。有些批号冰醋酸会产生棕色反应,影响测定结果。

  ③最终反应液偶尔会产生混浊,最常见原因是高脂血症。此时,可向3ml显色液中加入1.5ml异丙醇,充分混匀,溶解脂质可消除浊度,所测吸光度乘以1.5。注射右旋糖酐时,由于右旋糖酐不溶于邻甲苯胺试剂而产生混浊。冷水浴太冷时也可出现混浊。

  ④轻度溶血不影响测定,但1g/L血红蛋白能假性增高葡萄糖测定结果

  0.11mmol/L,胆红质也能增高测定管吸光度,342μmol/L胆红质能假性增高葡萄糖测定结果1.39mmol/L,血标本中含有EDTA(>1mg/ml),氟化钠(>5mg/ml)时,能增高显色强度,麝香草酚抑制颜色生成。

  ⑤邻甲苯胺法的测定结果基本上与葡萄糖氧化酶法和已糖激酶法相同,但尿毒症患者,邻甲苯胺法的测定结果略有偏高。

  ⑥邻甲苯胺试剂有毒并有致癌性,操作应避免皮肤接触或直接吸入。

  (2)葡萄糖氧化酶(GOD)法:

  ①葡萄糖氧化酶对β-D葡萄糖高度特异,溶液中葡萄糖约36%为α型,64%为β型。葡萄糖的完全氧化需要从α型到β型的变旋反应。国内某些商品葡萄糖氧化酶试剂盒含葡萄糖变旋酶,可加速这一反应,但在终点法中延长孵育时间可达到完成自发变旋过程。新配制的葡萄糖标准液主要是α型,故须放置2h以上(最好过夜),待变旋平衡后方可应用。

  ②葡萄糖氧化酶法测定的特异性较高,能干扰测定结果的物质很少,溶血标本血红蛋白的浓度达10g/L,黄疸标本胆红质浓度达342μmol/L。氟化钠浓度达2g/L,尿素浓度达46.7mmol/L(280mg/dl),尿酸浓度达2.95mmol/L,半胱氨酸的浓度达50mg/dl,甘油三酯浓度达500mg/dl,对测定结果均无影响,维生素C、谷胱甘肽、10mg/dl左旋多巴可能引起测定结果的负偏差。

  ③如果测血浆中糖,标本以草酸钾-氟化钠为抗凝剂较好。取草酸钾6g,氟化钠4g,加水溶解至100ml,吸取0.1ml到玻璃试管内,在80℃以下烤干使用,可使2~3ml血液在3~4h不凝固并抑制糖分解。

  ④方法学评价:GOD法线性范围至少可达19mmol/L;回收度94%~105%;变异系数批内为0.7%~2.0%;批间为2%左右;日间为2%~3%。准确度与精密度都能达到临床需要,操作简便,适用于常规检验。