间接免疫荧光试验

 间接免疫荧光试验介绍：
　　
　　间接免疫荧光试验是用对应某一种抗原的抗体(这里被称为一抗)与细胞孵育结合，在采用对应一抗(也就是抗一抗)的抗体(这里被称为二抗，二抗上偶联有荧光素分子)与细胞孵育结合后在荧光显微镜下观察。

间接免疫荧光试验正常值：
　　
　　<1:64

间接免疫荧光试验临床意义：
　　
　　异常结果：

　　单份血清效价≥1:64或双份血清效价呈4倍增长或有IgM抗体出现即可诊断为立克次体感染。本法不能区分患者感染的立克次体的类型。特异性抗立克次体的IgM抗体的出现提示新近感染。

　　需要检测的人群：

　　先天性弓形体感染 地方性斑疹伤寒 寇热 小儿支原体肺炎 布氏菌病等

间接免疫荧光试验注意事项：
　　
　　检查前：

　　抽血前一天不吃过于油腻、高蛋白食 物，避免大量饮酒。血液中的酒精成分会直接影响检验结果。体检前一天 的晚八时以后，应禁食，以免影响第二天空腹血糖等指标的检测。

　　检查时：

　　应放松心情，避免因恐惧造成血管的收缩、增加采血的困难

　　不适宜人群：没有

间接免疫荧光试验检查过程：
　　
　　1. 滴加0.01mol/L，pH7.4的PBS于待检标本片上，10min后弃去，使标本保持一定湿度。

　　2. 滴加适当稀释的荧光标记的抗体溶液，使其完全覆盖标本，置于有盖搪瓷盒内，保温一定时间(参考：30min)。

　　3. 取出玻片，置玻片架上，先用0.01mol/L，pH7.4的PBS冲洗后，再按顺序过0.01mol/L，pH7.4的PBS三缸浸泡，每缸3-5 min，不时振荡。

　　4. 取出玻片，用滤纸吸去多余水分，但不使标本干燥，加一滴缓冲甘油，以盖玻片覆盖。

　　5. 立即用荧光显微镜观察。观察标本的特异性荧光强度，一般可用“+”表示：

　　(-)无荧光;(±)极弱的可疑荧光;(+)荧光较弱，但清楚可见;(++)荧光明亮;(+++ --++++)荧光闪亮。待检标本特异性荧光染色强度达“++”以上，而各种对照显示为(±)或(-)，即可判定为阳性。